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    空腸彎曲菌灌胃經小鼠消化道排出后毒力與致周圍神經病變能力變化的分析.pdf 41頁

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    中文摘要 72小時采集小鼠糞便,并從糞便中分離純化上述2個時間點的空腸彎曲 菌分離變異株。將分離純化得到的72小時空腸彎曲菌lulei分離變異株和 NCTC 11168分離變異株分別灌胃第二批次小鼠,以此類推,直至完成9 個批次空腸彎曲菌的分離培養。 6.不同批次相同時間點,空腸彎曲菌分離變異株間生長繁殖能力及革 蘭染色形態變化觀察:細菌的生長繁殖能力是評價細菌毒力的重要指標, 分別采用平板菌落計數法和革蘭染色的方法比較各空腸彎曲菌分離變異 株間生長繁殖能力及革蘭染色形態變化的差異。 7.實驗動物一般情況的觀察:自灌胃當日起每天觀察小鼠的狀態:如 進食水情況、精神狀態、大便性狀、皮毛光滑程度、體重及肢體活動情況 等,一般觀察時間為30天,之后處死解剖動物,取雙側坐骨神經進行神 經病理觀察,如動物在30天內出現明顯癱瘓癥狀,隨時解剖取材病理觀 察。 8.不同批次小鼠周圍神經病理學檢查:采用HE染色、免疫組織化學 染色、鋨酸染色、甲苯胺藍染色和透射電子顯微鏡的方法觀察不同批次小 鼠周圍神經病理變化。 結果: 1.不同批次空腸彎曲菌分離變異株間單位時間內生長繁殖速度不同, 各批次相同采集糞便的時間點分離得到的變異株,隨著批次的增加空腸彎 曲菌生長繁殖能力逐漸增強,且呈現出非線性增強的趨勢。 2.不同批次空腸彎曲菌分離變異株間革蘭染色鏡檢觀察,形態發生變 化。隨著批次增加,空腸彎曲菌lulei分離變異株菌體逐漸變長、變細, 螺旋桿狀或彎曲桿狀程度逐漸明顯,呈雙“S”形或三“S"形;空腸彎 曲菌NCTC11168分離變異株間菌體逐漸變短,存在由“直桿狀”向“C” 形變化的趨勢。 3./J、鼠一般情況的觀察:第7批次lulei組1只小鼠于灌胃后72小時 出現明顯雙側后肢完全癱瘓癥狀,完全依靠前肢拖拽活動,活動能力差, 進食水少,精神狀態不佳,毛豎起,體重無明顯減輕,大便性狀無明顯改 變,余實驗組和對照組小鼠在灌胃后30天解剖時活動能力及進食水情況 如常,精神狀態好,體重無明顯減輕。 4./J、鼠周圍神經病理學觀察:第7批次lulei組1只癱瘓小鼠坐骨神經 中文摘要 出現明顯病理學改變,表現為:HE染色可見軸索粗細不均,表面不光滑, 部分斷裂。免疫組織化學染色可見髓鞘斷裂消失;軸索粗細不均、斷裂。 鋨酸染色可見脫髓鞘表現,神經髓鞘回縮,呈“城墻樣"改變,在郎飛氏 節附近髓鞘回縮明顯;同時在郎飛氏節附近可見髓鞘再生。甲苯胺藍染色 可見髓鞘脫落、斷裂,部分髓鞘向軸索方向脫落壓迫軸索,同時可見髓鞘 再生,軸索出現華勒樣變性。透射電子顯微鏡觀察,可見線粒體脊消失, 線粒體外膜腫脹;軸索膜與髓鞘膜分離,髓鞘板層結構消失,呈同心圓樣 向軸索方向回縮,壓迫軸索。余實驗組及對照組小鼠在灌胃30天后解剖 取坐骨神經,采用上述方法觀察病理學改變,表現為髓鞘及軸索光滑完整, 未見神經病理學變化。 結論: 11 1.不同來源的空腸彎曲菌lulei株和NCTC168株經連續多批次小鼠 灌胃消化道分離后,相同采集糞便時間點得到的變異株間生長繁殖能力隨 著批次增加逐漸增強,且增強趨勢為非線性。空腸彎曲菌分離變異株間革 蘭染色鏡檢細菌形態出現連續性變化。說明空腸彎曲菌在經過小鼠消化道 排出體外后毒力增強,且這種增強趨勢為非線性,空腸彎曲菌的形態在消 化道環境影響下發生連續改變。 2.不同毒力的空腸彎曲菌連續2次小鼠灌胃后,未出現明顯腹瀉癥狀, 但可以出現類似吉蘭.巴雷綜合征的癱瘓癥狀和周圍神經病理改變。說明 空腸彎曲菌在消化道環境中毒力增強不足以導致小鼠腹瀉癥狀的發生。雖 然空腸彎曲菌與吉蘭.巴雷綜合癥間關系密切,然而,伴隨空腸彎曲菌毒 力增強,其導致小鼠癱瘓癥狀及周圍神經病理改變的能力未出現同步加 強,說明擬通過使用經小鼠消化道后毒力加強的空腸彎曲菌2次口服灌胃 實驗小鼠的方法,不能達到建立穩定的類似吉蘭.巴雷綜合征臨床和周圍 神經病變動物模型的能力。 關鍵詞:空腸彎曲菌;生長繁殖能力;形態;周圍神經病變;小鼠 英文摘要 一————————————————————————————————————

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